细菌完成图
发布日期:2021-03-24 浏览次数:3206
如果您是研究微生物相关的,需要对细菌进行基因组测序,那么此篇由集思慧远整理的技术文档,恰逢其时!
细菌是自然界分布最广、个体数量最多的有机体,是大自然物质循环的主要参与者。细菌基因组相对较小,通常仅有一条环状DNA和质粒,通过高通量测序,可以了解其全部遗传信息。这也已经成为微生物研究的重要手段之一,为细菌的遗传进化、疾病预防与治疗、疫苗与抗生素的开发等提供重要的信息。
细菌完成图特性-others
而细菌基因组拼接质量,将直接影响后续分析。将细菌基因组测序后,从头进行组装,并最终组装成为一条contig(连续序列片段),即基因组的完整序列,也就是细菌完成图。得到目标细菌的基因组序列,就相当于有一把打开该物种神秘世界的钥匙。基于序列信息,结合数据库和预测软件,即可对其基因组进行破译,涉及基础功能代谢、致病性、耐药性、次级代谢产物资源等多个方面,还可以结合其他已有菌种的基因组信息,比较基因间的位置关系分析推测基因的功能特征、基因迁移规律等。比如根据基因组上目标基因上下游的特征,推测致病性、抗药性迁移规律。
难点
而细菌基因组GC含量较高、重复序列也较多、并且易于突变等这些特点,使用常规测序手段得到细菌完成图也还是有一些难度。
细菌完成图-ours
目前集思慧远细菌完成图是基于二代+三代测序技术,对细菌基因组进行测序、组装,从而获得完整细菌基因信息。并对其进行基因组组分分析:重复序列、编码基因、非编码RNA、前噬菌体、基因岛、CRISPR等;功能注释,主要包括通用数据库,如:Nr、Uniprot、COG、KEGG等数据库,以及CAZyme、PHI、ARDB等专有数据库注释;比较基因组分析,比较测序样本与参考基因组的差异,包括:基因家族构建、共线性分析、共有/特有基因分析、物种进化分析、选择压力分析等。全面解析其微生物生物学意义。
重点
集思慧远细菌完成图测序承诺:0 Gap技术指标。一般细菌完成图的技术路线为:当我们分离纯化出一株细菌,都会先做一代菌种鉴定,大致了解该菌的基本信息,然后再确定是否进行基因组测序。2代Illumina测序可以对目标菌株进行污染评估验证,判定该菌是否是纯菌,还有另一点是会辅助基因组的组装。同时联合3代Pacbio/Nanopore测序平台,利用其测序超长读长以及测序的无偏向性,能够快速、准确、完整的进行基因组的组装。最后采用纠错软件利用二代数据进一步对组装基因组进行纠错,得到最终0Gap的完美基因组。分析内容流程图如下所示:
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