谷氨酸棒杆菌-更具优势的原核蛋白表达系统
发布日期:2021-10-21 浏览次数:5891
蛋白表达是指用模式生物如细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术。根据宿主的差异可将表达系统分为原核表达系统和真核表达系统。
自20世纪70年代以来,大肠杆菌一直是基因工程中应用最广泛地表达系统。尤其是进入后基因组时代以来,有关蛋白结构以及功能研究的开展,对基因表达的要求更高,这时大肠杆菌往往是重组表达地首选宿主。
而因具有无内毒素、高蛋白纯度、分离纯化简单等优势,近年来谷氨酸棒杆菌也正逐渐被开发用于外源重组蛋白的表达。
谷氨酸棒杆菌谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum,C.glutamicum)作为重要的工业生产菌株,由于其显著的优点,不仅用于氨基酸等化合物的生产,还被用于外源蛋白的表达。
谷氨酸棒杆菌和大肠杆菌表达系统的比较
谷氨酸棒杆菌优势之——无内毒素
内毒素去除过程不仅对检测设备、检测试剂具有更高需求,也延长了蛋白产品的生产时间线,增加了成产成本。同时内毒素去除过程还增加了目的蛋白的损失。相比之下,谷氨酸棒杆菌表达系统不存在上述问题。
谷氨酸棒杆菌优势之——蛋白分离纯化简单
谷氨酸棒杆菌表达系统具有很强的分泌能力,极大简化了重组蛋白的下游分离纯化步骤,降低了下游纯化成本和对人力、细胞破碎设备的需求。
谷氨酸棒杆菌优势之——高蛋白纯度
谷氨酸棒杆菌不仅具有很强的分泌能力,而且与枯草芽孢杆菌相比,胞外杂蛋白更少,目的蛋白(纯度>90%)。
谷氨酸棒杆菌应用实例
表达案例1
客户A:骨代谢检测试剂盒中标品人I型原胶原N端前肽(PINP)的表达
生产现状: PINP主要从人胸水中提取,产量约0.2 mg/L。
客户诉求: PINP能够在谷氨酸棒杆菌中成功分泌表达,产量达到10 mg/L。
最终结果: PINP蛋白能够在谷氨酸棒杆菌中分泌表达,摇瓶中发酵产量达到 20 mg/L,且具有很好的活性。
表达案例2
客户B:兽用疫苗生产
生产现状:大肠杆菌中胞内可溶生产,50 L罐子产量约62mg/L。
客户诉求:抗原蛋白能够在谷氨酸棒杆菌中分泌表达,产量达到250 mg/L。
最终结果:抗原蛋白能够在谷氨酸棒杆菌中分泌表达,5 L 发酵罐中分批补料发酵产量达到1010 mg/L。
客户只需提供目的基因信息,集思慧远负责高效表达菌株的筛选,以及目的蛋白的纯化。
谷氨酸棒杆菌蛋白表达项目及周期

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